海南表面微生物分析方法验证信息「世纪久海」

微生物限度检查

计数方法适用性试验

   1.供试液制备

   根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1 小时。

   常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用，应建立其他适宜的方法。

   1水溶性供试品 取供试品，用ph7.0无菌--蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液。若需要，调节供试液ph值至6～8。-时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。

   2水不溶性非油脂类供试品 取供试品，用ph7.0无菌--蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成1：10供试液。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节供试液ph值至6～8。-时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。注：有所接种必须无菌操作培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。

   3油脂类供试品 取供试品，加入无菌十四烷酸-酯使溶解，或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无-性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃特殊情况下，zui多不超过45℃，小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成1：10供试液，保温，混合，并在zui短时间内形成乳状液。-时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。固质培养：是将jun种接至疏松而富有营养的固体培养基中，在合适的条件下进行微生物培养的方法。

非无菌-微生物限度标准

   4.非无菌含药材原粉的中药制剂的微生物限度标准见表2。

   5.非无菌-原料及辅料的微生物限度标准见表3。

   6.中药提取物及中药饮片的微生物限度标准见表4。

   7. 有兼用途径的制剂

   应符合各给药途径的标准。

   非无菌-的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法通则1105” 检查；微生物保存基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上，人为地创造一个有利于休眠的环境，使其长期保存后仍能保持zhong原有的优良特性。非无菌-的控制菌照“非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法通则1106” 检查。各品种项下规定的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数标准解释如下：

   l01cfu：可接受的zui大菌数为20；

   102cfu：可接受的zui大菌数为200；

   103cfu：可接受的zui大菌数为2000；依此类推。

   本限度标准所列的控制菌对于控制某些-的微生物可能并不quan面，因此，对于原料、辅料及某些特定的制剂，根据原辅料及其制剂的特性和用途、制剂的生产工艺等因素，可能还需检查其他具有潜在危害的微生物。

-微生物限度检测的内容：

1.无菌检查。

2.微生物限度检查。

3.微生物总数检查。

4.控制菌检查大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌、铜绿假单胞菌、金黄色、梭菌、白色等。

微生物限度检测条件：

1、检查环境和人员要求

1环境要求 : 无菌室内进行。背景洁净度10,000 级下的局部 100 级，单向流空气。

2操作人员：卫生、着装符合要求。

3操作要求：严格遵守无菌操作，严防污染。

2、方法验证

由于某些供试品具有活性，在建立测定方法或原测定法的检验条件发生改变时，可能影响检验结果的准确性，必须对供试品的-活性及测定方法的-性进行验证。

3、正确抽样

1抽样方法：

u 随机；

u 优先抽有疑问样品；

u 抽样量：检测用量的 3~5 倍；

2检测用量

3检测量