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{微生物检测}微生物接种





4、浇混接种

该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。

5、涂布接种

与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落。

6、液体接种

从固体培养基-菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物-菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种。

7、注射接种

该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的yimiao预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些-。

8、huoti接种

huoti接种是专门用于培养-或其它病原微生物的一种方法,因为-必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的huoti可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴等;也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射,也可以是拌料喂养。

注:有所接种必须无菌操作

培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。

(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞。



-效力

-剂效力测定用培养基应进行培养基的适用性检查,包括成品培养基、由脱水培养基或按配制的培养基均应检查。

7.2试验所用的菌株传代次数不得超过5代从保藏中心获得的冷冻干燥为第0代,并采用适宜的保藏技术进行保存,以-试验菌株的生物学特性。

铜绿假单胞菌     pseudomonas aeruginosa〔cmcc(b)10 104〕

大肠埃希菌        escherichia coli 〔cmcc(b) 44 102〕

金黄色菌 staphylococcus aureus〔cmcc(b)26 003〕

白色菌         candida albicans 〔cmcc(f) 98 001〕

黑曲霉                aspergillus  niger 〔cmcc(f)

98 003〕









-效力-菌液制备

-效力-菌液制备


取大肠埃希菌、金黄色putao球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物用 ph7.0 无菌--蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌-溶液制成 适宜浓度的菌悬液。一般应随机抽取不少于检验用量(两个以上xiao包装单位)的3倍量供试品。取表 2 黑曲霉的新鲜培养物加入 3~5ml 含 0.05%ml/ml聚山梨酯80 的 ph7.0 无菌--蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌-溶液,将孢子洗脱。然后,采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内,用含 0.05%ml/ml聚山梨酯80 的 0.9%无菌-溶液制成适宜浓度的孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置,应在 2 小时内使用;若保存在 2~8℃,可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2~8℃,在验证过的贮存期内使用。






微生物限度检查





   3mpn法 mpn法的精密度和准确度不及薄膜过滤法和平皿计数法,仅在供试品需氧菌总数没有适宜计数方法的情况下使用,本法不适用于霉菌计数。若使用mpn法,按下列步骤进行。

   取照上述“供试液的制备”“接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液至少3个连续稀释级,每一稀释级取3份1ml分别接种至3管装有9~10ml胰酪大豆胨液体培养基中,同法测定菌液对照组菌数。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。-时可在培养基中加入表面活性剂、中和剂或灭活剂。

   接种管置30~35℃培养3天,逐日观察各管微生物生长情况。除另有规定外,本检查法中-及控制菌培养温度为30℃~35℃。如果由于供试品的原因使得结果难以判断,可将该管培养物转种至胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基,在相同条件下培养1~2 天,观察是否有微生物生长。根据微生物生长的管数从表3查被测供试品每1g或每1ml中需氧菌总数的可能数。





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